Prof. Mlinarič-Raščan je mentorica številnim dodiplomskim in podiplomskim študentom.  V kolikor vas zanima raziskovalno delo pod mentorstvom prof. Mlinarič-Raščan, pišite na irena.mlinaric@ffa.uni-lj.si.

Predavateljica in nosilka predmetov

Povezanost polimorfizmov v izbranih genih folatnega cikla z napakami nevralne cevi

Znano je, da so NTD povezane s pomanjkanjem folatov ter da folna kislina zmanjša možnost okvare nevralne cevi. Zato so geni za encime, ki sodelujejo pri metabolizmu folatov dobri kandidati za genetske markerje tveganja za NTD. Med njih sodijo tudi MTHFR, GNMT in TPMT. MTHFR je pomemben encim pri metabolizmu folatov in vpliva na koncentracijo Hcy. GNMT je metiltransferaza, ki katalizira pretvorbo SAM v SAH, ter kvantitativno pretvori največji delež SAM v organizmu glede na ostale metiltransferaze. Aktivnost tega encima je torej pomembna, ker najbolj od vseh metiltransferaz vpliva na koncentracijo SAM, ki vpliva na aktivnost MTHFR. TPMT je ravno tako metiltrasferaza, ki katalizira pretvorbo SAM v SAH preko reakcije S-metiliranja tiopurinov. Njegova biološka funkcija in endogeni substrat nista znana. Polimorfizmi naštetih genov vplivajo na aktivnost pripadajočih encimov in posledično na koncentracijo Hcy. Predvidevamo, da je Hcy nevro- in embriotoksičen. Ugotovljeno je bilo, da je bila njegova koncentracija zvišana v plazmi mater, ki so imele otroka z NTD. Medtem, ko je povezava med polimorfizmi MTHFR in NTD že dokazana v nekaterih drugih populacijah, pa direktna povezava med GNMT oz. TPMT in NTD še ni bila raziskana. 

Metodologije

Indukcija apoptoze v humanih celičnih linijah limfocitov B s stimulacijo receptorja EP4

Odziv limfocitov B na stimulacijo B-celičnega receptorja (BCR) je pogojen s stopnjo razvoja. Zrele celice B se odzovejo z intenzivno proliferacijo, nezrele pa z apoptozo. Signalni mehanizmi, ki pri zrelih celicah sprožijo proliferacijo preko BCR, so dobro poznani, manj znani pa so mehanizmi, ki zaustavijo rast in sprožijo apoptozo pri nezrelih limfocitih B. Predhodne raziskave diferencialne genske ekspresije s pomočjo mikromrež so pokazale, da je na genskem nivoju največja razlika med zrelimi in nezrelimi celicami B po stimulaciji BCR v ekspresiji gena Ptger4, ki kodira prostaglandinski receptor EP4.

Cilj raziskav

je ugotoviti, kje in v kakšni meri humani maligni limfociti B izražajo receptor EP4 in ali stimulacija receptorja EP4 v humanih modelnih linijah B levkemij in limfomov vodi v zastoj celične rasti in apoptozo. 

Metodologije

1. s pomočjo pretočne citometrije in fluorescenčne mikroskopije bomo ugotavljali prisotnost receptorja na izbranih celicah ter poizkušali ovrednotiti razliko v njegovi ekspresiji med zdravimi in maligno spremenjenimi limfociti B. 
2. s pomočjo testov celične metabolne aktivnosti ter uporabo specifičnih agonistov bomo ugotavljali učinke stimulacija receptorja EP4 na izbrane celice. 
3. proučevanje vpliva na celični cikel in proliferacijo ter programirano celično smrt 

Farmakogenetski pristop k raziskavam, diagnostiki in terapiji levkemij

Projekt temelji na potrebi po prenosu sodobnih spoznanj farmakogenetike in metodologij genomike, transkriptomike in metabolomike v klinično prakso, s ciljem izboljšati diagnostiko in terapijo otroških levkemij.
Kljub napredku v razumevanju bioloških osnov kancerogeneze je antitumorsko zdravljenje še v veliki meri empirično. Glavni problem kemoterapije je ozko terapevtsko okno in posledična neuspešnost terapije oziroma visoka toksičnost pri posameznih pacientih. Implementacija farmakogenomskih znanj in uvedba novih diagnostičnih metod omogočata individualizacijo zdravljenja, kar omogoča izboljšanje učinkovitosti zdravil, zmanjšanje neželenih učinkov in posledično cenovno ugodno zdravljenje.
Tiopurinska zdravila so terapija izbora pri zdravljenju akutne limfoblastne levkemije (ALL), ki predstavlja najpogostejšo obliko raka pri otrocih. Rezultati naših predhodnih raziskav kažejo, da lahko z določitvijo alelnih polimorfizmov v genu za tiopurin S-metil transferazo (TPMT), ki katalizira S-metiliranje 6-MP in je omejujoč faktor za pretvorbo 6-MP do 6-tiogvanin nukleotidov (6-TGN), odgovornih za citotoksične učinke zdravila, s precejšnjo verjetnostjo napovemo aktivnost encima in posledično stopnje toksičnosti zdravila. Poleg genotipa vplivajo na aktivnost omenjenega encima tudi drugi dejavniki. Poznavanje le-teh je pomembno za izboljšanje varnosti ter učinkovitosti terapije ALL. Namen predlaganega projekta je doprinest k razumevanjem kompetitivnih poti in encimov, ki so vpleteni v presnovo tiopurinov, z raziskavami na molekularnem nivoju pa doprinesti k razumevanju mehanizmov ter identifikaciji potencialnih tarč za nove generacije terapevtikov.

Cilji raziskave

1. Iskanje diagnostičnih označevalcev in njihovo uvajanje v klinično prakso
2. Identifikacija terapevtsko pomembnih bioloških tarč
3. Razumevanja molekularnih mehanizmov odziva na tiopurinsko zdravljenje
4. Razvoj dozirnega algoritma za 6-MP

Iskanje fiziološke vloge tiopurin S-metilstranferaze

Encim tiopurin-S-metiltransferaza (TPMT) ima velik vpliv na izid zdravljenja s tiopurini. Interindividualna raznolikost odziva na tiopurine je namreč lahko posledica prisotnosti genskih polimorfizmov in interakcij endogenih in eksogenih snovi z encimom. Poglaviten namen raziskovalnega dela v tem sklopu je poglobiti razumevanje delovanja encima TPMT in njegove endogene vloge. V sklopu raziskovanja endogene vloge TPMT se osredotočamo na selenove spojine, saj je znano, da TPMT poleg tiopuinov katalizira tudi reakcijo metilacije njihovih selenovih analogov.

Metodologija

- Celični modeli z znižanim in zvišanim izražanem TPMT, ugotavljanje citotoksičnosti slenenovih spojin
- Pretočna citometrija za analizo dejavnikov odziva na selenove spojine – celični cikel, oksidativni stres, apoptoza.
- Analiza izražanja tarčnih genov na mRNA in proteinskem nivoju.

Projekti

Prof. dr. Mlinarič-Raščan je dejavna v številnih strokovnih komisijah.

Biološka zdravila – predstavitev v javnosti

Obveščanje javnosti o principih uporabe bioloških tarčnih zdravil, ki delujejo usmerjeno na določen tip rakaste celice je izrednega pomena, saj s tem pripomoremo k razumeavanju uporabe pri ciljani skupini pacientov in nenazdnje k zaupanju javnosti in pacientov do zdravnikov in farmacevtov, ki načrtujejo in izvajajo terapijo. Sodobna farmakoterapija zahteva aktivno participacijo pacientov, razumevanje načina delovanja zdravil, razumevanje genetskih diagnostičnih testov in na tem temelječega izbora zdravil.

S predstavitvijo v javnosti krepimo razumevanje posameznika o specifičnosti bolezni in uporabi bioloških zdravil. Prof. Mlinarič-Raščan je doprinesla k razvoju radiofarmaka, ki bo omogočal odkrivanje malignih limfomov, s prisotnostjo antigena CD20. Razvita metodologija je omogočila izdelavo reduciranega rituksimaba, primernega za sprotno označevanje z dodatkom prostega (99mTc) pertehnetata, kot to zahteva klinična praksa. Dokazali so, da je radiofarmak 99mTc-rituksimab primeren za uporabo kot radiodiagnostik za zgodnje odkrivanje, ugotavljanje razširjenosti, remisije, metastaziranja in ponavljanja ne-Hodkinovega limfoma.

http://tvslo.si/predvajaj/v-zivo-tv-slovenija-2/tv.slo2/#ava2.132001162Intervju:

http://ars.rtvslo.si/prof-dr-irena-mlinaric-rascan/

Raziskovalna skupina prof. Mlinarič-Raščan

V kolikor vas zanima delo v raziskovalni skupini prof. Mlinarič-Raščan, pišite na irena.mlinaric@ffa.uni-lj.si.

Doc. dr. Nataša Karas-Kuželički

Docentka
Doktorska disertacija: Motnje v presnovi galaktoze kot dejavniki tveganja pri razvoju sive mrene
E-mail: Natasa.KarasKuzelicki@ffa.uni-lj.si


Doc. dr. Alenka Šmid
Doktorska disertacija: Proučevanje biokemičnih in genetskih dejavnikov pri individualizaciji zdravljenja s tiopurini
E-mail: alenka.smid@ffa.uni-lj.si


Asist. dr. Tijana Markovič
Asistentka
Doktorska disertacija: Vrednotenje imunske modulacije in učinkovitosti agonista receptorja EP4 in monoklonskih protiteles in vitro
E-mail: tijana.markovic@ffa.uni-lj.si

Asist. dr. Dunja Urbančič
Raziskovalka
Doktorska disertacija: Farmakogenomsko vrednotenje dovzetnosti na tiopurine
E-mail: dunja.urbancic@ffa.uni-lj.si


Znanst. sod. dr. Maša Kandušer
Raziskovalka
E-mail: masa.kanduser@ffa.uni-lj.si


Asist. Sanja Nabergoj
Mlada raziskovalka

Asist. Damjan Avsec

Mladi raziskovalec

Asist. Luka Hiti

Raziskovalec


Asist. Dr. Tanja Gmeiner